Y SINH

DIAGNÓSTICO MOLECULAR
JOSE A. SANCHEZ ALCAZAR
MIGUEL ANGEL MARTIN CASANUEVA
LUIS M. JIMENEZ JIMENEZ
MANUEL REY BARRERA
Curso 2003-04
Martes, 3 de Febrero, 11:00-13:30.... Introducción
Reparación del DNA ….....José A. Sánchez Alcázar
 
Miercoles,4 de Febrero, 11-13:30…..Mutaciones.…….…………Jose A. Sánchez Alcázar
 
Jueves, 5 de Febrero, 11:00-13:30....Técnicas en diagnóstico molecular....Manuel Rey
 
Viernes, 6 de Febrero, 9:30-13:30........RFLP.............………......Miguel Angel Martin
15:30-19:30.... ...Práctica.......…..………...Miguel Angel Martin
 
Lunes, 9 de Febrero, 10:30-13:30.......Genética Molecular: Enfermedades Genéticas. Herencia Humana..………………....Luis M. Jimenez
 
Martes, 10 de Febrero, 9:30-13:30......Práctica de SSCP...………....José A. Sánchez Alcázar
15:30-19:30.....Práctica de Light Cycler....... Luis M. Jimenez
 
Miercoles, 11 de Febrero 9:30-13:30.......Secuenciación. Práctica de Secuenciación........Manuel Rey
DIAGNOSTICO MOLECULAR
Título: Molecular diagnostics : a training and study guide / Gregory J. Tsongalis and William B. Coleman. Publicación . Washington : AACC Press, cop. 2002
 
Título: The metabolic & molecular bases of inherited disease / editors, Charles R. Scriver ... [et al.]. Publicación: New York : McGraw-Hill, cop. 2001.

Título: Molecular diagnosis of infectious diseases / edited by Udo Reischl ; foreword by Hans Wolf. Publicación: Totowa (New Jersey) : Humana Press, cop. 1998.
 
 

Título: Introduction to molecular medicine / Dennis W. Ross ; illustrations by David Pounds. Publicación: New York : Springer, c2002.
 
 
Título: Molecular medicine : novel findings of gene diagnosis, regulation of gene expression, and gene therapy: proceedings of the Second Meeting of Hirosaki International Forum of Medical Science, Hirosaki, Japan, 7 July 998 / editors, Isao Hashimoto ... [et al.] Publicación: Amsterdam : Elsevier, 1999
BIBLIOGRAFIA
EVALUACIÓN


ASISTENCIA A TEORIA Y PRACTICAS
El genoma humano


-Contiene aproximadamente 75000 genes repartidos en 23 pares de cromosomas

-Sólo una pequeñaa fraccion de estos genes y su función se han identificado
Cómo afectan los genes a la salud?

Podemos heredar mutaciones genéticas.
Podemos adquirir mutaciones genéticas durante nuestra vida.
Podemos tener una base genética que nos predispone a ciertas enfermedades
Sección 1.
Introdución al Diagnóstico Molecular
Introducción a los conceptos esenciales en el diagnóstico molecular para la identificación de nuevos marcadores de las enfermedades humanas, y desarrollar, y aplicar los ensayos moleculares útiles para el seguimiento de la enfermedad, y determinar las estrategias terapeúticas apropiadas, y el pronóstico de la enfermedad.
Objetivo
• Definición de diagnóstico molecular
• Impacto del diagnóstico molecular en las enfermedades humanas
• Patología molecular en el laboratorio médico
• Desarrollo histórico de la biología molecular
• Tecnología genómica y aplicaciones
• Perspectivas futuras del diagnóstico molecular
Sinopsis
La utilización de las ténicas de biología molecular con el fin de ampliar el conocimiento científico de la historia natural de las enfermedades, identificando los pacientes con riesgo de desarrollar enfermedades específicas, y diagnosticar enfermedades infecciosas y de otro tipo, a nivel de los ácidos nucleicos
Diagnóstico Molecular: definición
La identificación de nuevos marcadores moleculares de las enfermedades facilitará el desarrollo de ensayos moleculares útiles para la detección, diagnóstico, y predicción del desarrollo de la enfermedad.
Principios que guian la busqueda de nuevos marcadores moleculares de las enfermedades humanas
Seguimiento de la enfermedad
Permite una detección y tratamiento más tempranos
Determina un tratamiento más apropiado
Reduce o elimina tratamientos innecesarios
Reduce la morbilidad y mortalidad del paciente
Diagnóstico Molecular
• Diagnóstico
• Pronóstico
• Terapeútico
Aplicaciones Prácticas del Diagnóstico Molecular en el Laboratorio Médico
• Anatomia patológica
• Química/toxicología
• Genética
• Hematopatología y/oncología
• Enfermedades Infecciosas
• Medicina Transfusional /identidad
Aplicaciones de las Tecnologias Genómicas en el laboratorio Médico
El avance en el conocimiento de la estructura y química de los ácidos nucleicos ha facilitado el desarrollo de tecnologías que pueden utilizarsre en el diagnóstico molecular
Técnicas de Blotting Métodos Electroforéticos
Southern hybridization
Northern hybridization
SSCP
DGGE (Denaturing Gradient Gel Electrophoresis)
MDE (Mutation Detection Enhancement)

Técnicas de Amplificación
PCR
TMA (transcription mediated amplification)
LCR (ligase chain reaction)
NASBA (Nucleic acid sequence based amplification)
Bdna (branched DNA)

Secuenciación del DNA
Tecnología Molecular
Tipos de muestra para el diagnóstico molecular
• Sangre total
• Médula ósea
• Suero/plasma
• Celulas bucales
• Celulas cultivadas
• Fluidos corporales
– CSF
– Lavado bronquial
– Liquido Amniótico
– Semen
– Orina
• Biopsias tisulares
– Frescas/congeladas
– En parafina
• Pelo
• Pueden diagnosticarse las enfermedades con base genética.
• La especificidad puede ser controlada.
• Pueden detectarse cambios simples de bases.
• No se requiere la expresión del producto génico.
• El fragmento de DNA puede amplificarse >105.
¿Porqué son importantes los ácidos nucléicos en el laboratorio clínico?
Enfermedad
Causa (etiología)


Mecanismo (patogénesis)


Alteraciones estructurales (morfológica/molecular)


Consecuencias Funcionales (significancia clínica)
The Human Genome Project
• U.S. Government project coordinated by the Department of Energy and the National Institutes of Health
• Goals of the Human Genome Project
(1998–2003)
– to identify all of the genes in human DNA;
– to determine the sequences of the 3 billion bases that make up human DNA;
– to create databases;
– to develop tools for data analysis; and
– to address the ethical, legal, and social issues that arise from genome research.
• Mejoras en la Medicina: establecer riesgo de enfermedades
• DNA Forense/Identidad
• Mejor comprensión de la evolución y las migraciones humanas
Beneficios del Proyecto Genoma Humano
• Use of genetic information
• Privacy/confidentiality
• Psychological impact and stigmatization
• Genetic testing
• Reproductive options/issues
• Education, standards, and quality control
• Commercialization
• Conceptual and philosophical implications
The Human Genome Project
Ethical, Legal, and Social Implications