TIN SINH HỌC P12

Chia sẻ bởi Võ Phương Thảo | Ngày 23/10/2018 | 58

Chia sẻ tài liệu: TIN SINH HỌC P12 thuộc Bài giảng khác

Nội dung tài liệu:

TÌM HIỂU VỂ GEN KIỂM SOÁT SỰ RA HOA
Giảng viên giảng dạy: TS. Võ Văn Toàn
Học viên thực hiện : Lê Hồng Linh
THẾ NÀO LÀ ĐỦ KHẢ NĂNG RA HOA?
Tình trạng đủ khả năng ra hoa trên cây xoài được Protacio (2000) định nghĩa là khi đạt được tình trạng mà hàm lượng gibberellin trong lá xuống dưới một ngưỡng nào đó. Có nhiều bằng chứng để chứng minh cho luận điểm nầy. Ở Thái Lan, mức độ GA giảm đều đặn và cây ra hoa ở thời điểm có hàm lượng GA thấp nhất. Tongumpai và csv. (1991) cho rằng chất giống như GA giảm trong chồi của cây xoài ở giai đoạn 6 tuần trước khi ra hoa không thể phát hiện được. Ngoài ra, việc áp dụng GA ngoại sinh ở các nồng độ từ 10-1 đến 10-2 M trước khi phân hóa mầm hoa có tác dụng ngăn cản sự ra hoa từ 95-75 % (Kachru và csv., 1971).Bằng chứng khác là việc làm ức chế sinh tổng hợp của GA có tác dụng thúc đẩy sự ra hoa (Rath và Das, 1979; Salomon và Reuveni, 1994 và Villanueva, 1997). Hoặc hạn chế sự tổng hợp GA bằng biện pháp vật lý như việc cắt rễ cũng cho thấy làm tăng sự ra hoa (Bugante và csv., 1994). Những bằng chứng trên cho thấy rằng sự hiện diện của GA biểu hiện sự ngăn cản sự đủ khả năng ra hoa trên cây xoài. Trên cây còn rất tơ (7 tháng tuổi) nhưng nếu được tháp lên nó chồi đã được xử lý ra hoa bằng paclobutrazol cũng có đủ khả năng ra hoa (Villanueva, 1997).
Sự chuyển từ giai đoạn sinh trưởng sang sinh sản
Sự thay đổi về hình thái giải phẩu của chồi ngọn: bao gồm:
• Sự kéo dài lóng
• Sự tượng của mầm chồi bên
• Sự sinh trưởng của lá giảm
• Sự thay đổi hình dạng của lá
• Sự tăng tỉ lệ của sự khởi của mô phân sinh lá
• Sự thay đổi hình dạng và kích thước mô phân sinh
Sự thay đổi về kiểu sắp xếp lá (Change in Phyllotaxis)
Sự thay đổi về mặt sinh hóa của mô phân sinh: gồm:
Sự tăng nhanh tế bào
Sự thay đổi phân tử
Sinh học của sự ra hoa
Theo Bùi Trang Việt (2000) hoa thành lập từ chồi ngọn hay chồi nách qua 3 giai đoạn:
(1) sự chuyển tiếp ra hoa: Mô phân sinh dinh dưỡng thành mô phân sinh tiền hoa- Đánh thức mô phân sinh chờ;
(2) sự tượng hoa: Sự sinh cơ quan hoa (quan sát được dưới kính hiên vi), sự phát triển của sơ khởi hoa làm chồi phồng lên thànhnụ hoa;
(3) sự tăng trưởng và nở hoa: Mầm hoa vừa hình thành có thể tiếp tục tăng trưởng và nở hoa hoặc vào đi vào trạng thái ngủ.
Gene kiểm soát sự ra hoa
Tùy thuộc vào thời kỳ hoạt động khác nhau trong sự kiểm soát sự ra hoa, các gene nầy có thể chia thành hai nhóm là nhóm gene định dạng mô phân sinh hoa và gene định dạng cơ quan. Genes kiểm soát sự chuyển từ mô phân sinh chồi ngọn sang mô phân sinh hoa được gọi là genes kiểm soát sự ra hoa như LEAFY (LFY), APETALA 1 (AP1), AP2, CALIFLOWER (CAL), UNASUAL FLORAL ORGANS (UFO),... (Levy và Dean, 1998). Sự biểu hiện của những gene nầy kiểm soát thời điểm ra hoa của cây. Hai gene LFY và AP1 giữ vai trò đầu tiên trong sự khởi phát hoa của của chương trình ra hoa. Chức năng của gene được xác định bằng phương pháp chuyển gene. Trong cây chuyển gene của cây Arabidopsis chứa 35S::LFY, phát hoa thứ hai của lóng ở phía dưới được thay thế bằng một hoa đơn. Số lá dạng hoa hồng không giảm nhưng ít mầm trong chồi nách của dạng hoa hồng phát triển thành hoa và phát hoa trở thành hoa tận cùng. Trong trường hợp cực trọng, hoa tận cùng được tạo ra ngay sau khi lá dạng hoa hồng xuất hiện. Điều nầy cho thấy rằng sự biểu hiện quá mạnh của gene LFY có thể thúc đẩy sự tạo ra hoa tận cùng.
Sự sinh trưởng dinh dưỡng và sự ra hoa là hai mặt trái ngược trong cây được cân bằng bởi nhiều yếu tố. Một số gene thúc đẩy sự sinh trưởng dinh dưỡng và ức chế sự ra hoa và một số gene có tác động ngược lại. Do đó, có hai con đường kiểm soát sự ra hoa là ức chế và thúc đẩy.
CHÚ THÍCH: Arabidopsis thaliana ( có tên thường gọi là cải xoong, cải xoong tai chuột hoặc Arabidopsis) là một thực vật có hoa nhỏ có nguồn gốc châu Âu , châu Á và tây bắc châu Phi. Mùa xuân hàng năm có chu kỳ cuộc sống tương đối ngắn, Arabidopsis là phổ biến như là một sinh vật mô hình trong sinh học thực vật và di truyền Arabidopsis thaliana có khá nhỏ. bộ gen, chỉ có 157 cặp megabase (MBP), và được giải trình tự trong một thời gian dài đã xác định có bộ gen rất nhỏ so với tất cả các thực vật có hoa nhưng bộ gen thực vật có hoa nhỏ nhất, hiện được cho là thuộc về các một loài thuộc chi Genlisea, trật tự Lamiales , với Genlisea margaretae, một cây ăn thịt, cho thấy một kích thước bộ gen của 63,4 MBP. Arabidopsis là hệ gen thực vật đầu tiên được giải mã, và là một công cụ phổ biến hiểu biết về sinh học phân tử của nhiều đặc điểm thực vật, bao gồm cả hoa phát triển và cảm biến ánh sáng.
>gi|323650478|gb|HQ585993.1| Mangifera indica cultivar Zihua LEAFY-like protein (LFY) gene, complete cds
TCAGTTGCTTAGAGGGATGGATCCCGAAGCTTTCACGGCGAGCTTGTTCAAGTGGGACCCCCGTGGGGTG
GTTCCTCCACAGACCAGAATGTTGGAGCCGGTGGCGCCACCACCGGTACCGTTGTCGGCGGCCACGGCGT
TTTCGGTGGTGCGTCCAAGGGAGCTGGGTGGGCTGGAGGAGTTGTTCCAGGCTTATGGGATAAGGTACTA
CACGGCAGCGAAGATAGCGGAGCCTGGGTTCACAGTTAATACACTTGTGGACATGAAAGATGAGGAGCTT
GATGAGATGATGAACAGCTTGTCTCAGATATTTAGGTGGGAACTCCTTGTTGGAGAGAGATATGGTATTA
AAGCTGCTGTTAGAGCTGAGAGGAGAAGGCTTGATGAGGAGGACTCACGAAGGCGTCAGATACTGTCTGG
TGATACTACCAACGCTGTTGATGCTTTCTCCCAAGAAGGTATGTTATCATTCCAGCTTTCTGCTACTATT
TCTTATGTCAATCTTATATTCTTTTTAGTTTTACACTTTAAAATTTTTTGCAAGAATGGAAAAAGAACTC
TAAAATGGACTGGTTTAATTCTTTTTTTTATATAGTGAATTGGACTTTGACCATAGCACAAGTGTTATAG
AGCAATAGTTTTTTCTTGCTTTTTCGATTTTTTTTTCTCTCTAATGCTCTGTAGCTACGTTGTTCTGTTG
GTACGTAAAGTTGGTTATTAGCTTGTGTGGTATATAACTATAGAACTTCAGAACTTTTTCGACAAAATCT
TCCACTTACCTCTCTCAATCAAATGACAAAACATTGGGATGGAACTTGAAAGTATCAGTGTCCCAAGTTA
CAATATGGTGACAAAGGAAAGAAATATACTACGTATATGGTATTCATTCCTACCCAAAAATGGGGCAGTT
TACATTTAATCTTCATACTGGGTCTTCCGAGTTATTAAAGAGTCAATTTAGGAGTTAACTTTTATAAGTT
TTGCACAATTTATTATACTAGAATGCATGTGTGATTTTTTAAAAATTTGGTGGGGAATGATTTTCATGGG
TAGGGTTATCGGGGGAACCAGTGCAGCAAGAAAAGGAGGCAGCAGGTAGCGGCGGAGGAGGAACGTGGGA
CTTGGCGGTGGCAGTGGCGGACAGGAAGAGACCGCGGCGGAGAAAGGAGCAAAGGAAGATAGTGGATGTT
AATCACTACGATGAAAACGAAGACGATGAGAACGGTGAAGGTAGTGAGAGACAAAGAGAGCACCCCTTCA
TAGTGACTGAGCCTGGTGAAGTGGCACGTGGCAAGAAGAACGGCCTTGATTACCTCTTCCATCTTTATGA
ACAATGCCGTGATTTCTTGATCCAGGTCCAGAACATCGCCAAGGAGCGTGGCGAAAAGTGCCCAACCAAG
GTAACATTCTTTAAATCAACACCGTCCATTTCATCAGTCCATTTCATCACAAGGACGGTCTACAATCTAC
AATCATAACCATGCATACTTGACTCAGCCCACGGGCTGGAGTTACTAGAATTTGGCCGGGATTTGGCACC
CCAATGTGGTACTTCAATGACGAGCTGTTCCACTGAAATTATGACAAGTTTCAGTACGGCCGAAATGGCA
GGTTGCAGAAGGGTTCTTAAATAATTTTTGTCCTACAAATCCATGGTTAAAAGATTTCTTCATCACATTG
TACATAGGACACTTGCATGCATCTTAACAGAACATTTAATCTGTTCCAGAGAAAAAGCGACAAAGCGAAC
CCGTTTTAATTATTAAATATTTTGTAGTTTACTCCTTATAATTAAGTGGTTGAGTCGGGCATGTGAGTTT
TCGCAGGTGACAAATCAGGTGTTTAGGTTTGCAAAGAAGGCTGGGGCAAGCTATATTAACAAGCCAAAAA
TGAGACACTATGTGCATTGCTATGCGTTGCATTGCCTGGACGAGGAAGCATCAGATGCACTGAGGAGGGT
TTTCAAGGAAAGAGGAGAGAACGTGGGGGCTTGGCGACAGGCTTGCTATAAGCCACTTGTGGGCATAGCA
GCACGGCAAGGTTGGGATATTGATGCCATTTTCAATGCGCATCCTCGTCTGGCCATTTGGTATGTGCCCA
CTAGGCTGCGTCAACTCTGTCATGCCGAGCGCAATGGTGCTGCTGCTTCTAGCTCTGTTTCTGCCGAGGC
TGATCAGCTGCCTTTCTAAATTAAATTAAAGCCGGACTGAAGAGAGAAAATTTAGTTAATGGTATTTACA
GTGTCTGTTATTACAGTGTTGATTCGTCAATGTTTGTAATCTCACTTCATTTGGACGGAT
TÌM KHUNG ĐỌC MỞ ORF CỦA GEN ORF BẰNG NCBI
TÌM KHUNG ĐỌC MỞ ORF CỦA GEN LFY BẰNG PHẦN MỀM DNA CLUB
Vị trí của khung đọc mở
SO SÁNH TƯƠNG ĐỒNG VÀ TẠO CÂY PHÁT SINH LOÀI CỦA GEN LFY Ở MỘT VÀI GIỐNG XOÀI BẰNG PHẦN MỀM CLUSTALX2 VÀ TREEVIEW X
Những vị trí giống nhau được tô màu giống nhau
SO SÁNH TƯƠNG ĐỒNG VÀ TẠO CÂY PHÁT SINH LOÀI CỦA GEN LFY Ở MỘT VÀI GIỐNG XOÀI BẰNG PHẦN MỀM CLUSTALX2 VÀ TREEVIEW X
Con đường ức chế sự ra hoa
Kiểu hình của sự ra hoa được thúc giục trong sự đột biến mất chức năng (loss-of-function mutants) cho thấy rằng một số gene giữ vai trò ức chế sự ra hoa ở cây hoang dại.
Gene EMF1 (EMBRYONIC FLOWER) được xem là có vai trò chính trong sự ức chế sự ra hoa vì sự đột biến emf1 ra hoa mà trước đó không qua giai đoạn sinh trưởng dinh dưỡng. Trong sự đột biến emf1 cấu trúc các cơ quan sinh sản như núm nhụy và cấu trúc như bầu noãn xuất hiện trên tử diệp và chồi sản xuất lá không có dạng hoa hồng (Sung và ctv., 1992; Castle và Sung, 1995). Gene EMF được xem là giữ vai trò chính trong việc ức chế sự ra hoa và chức năng nầy giảm cùng với sự phát triển của cây. Khi mà mức độ EMF giảm đến một mức độ nào đó, mô phân sinh chồi ngọn phân hóa thành mô phân sinh hoa và quá trình khởi phát hoa. Trong một số trường hợp đột biến kép (như emf/co và emf/gi) kiểu hình của đột biến emf không thể phục hồi lại. Điều nầy cho thấy rằng chức năng của những gene nầy là ngăn cản sự hoạt động của emf trong trường hợp bình thường. Thời gian ra hoa kéo dài trong sự đột biến co và gi do kết quả từ sự thúc đẩy của gene EMF(Martinez-Zapater và ctv., 1994; Weigel và Nilsson, 1995). Phân tích sự đột biến EMF cho thấy sự sinh trưởng sinh sản là tình trạng căn bản trong sự phát triển của cây và sự phát triển sau đó là một quá trình làm giảm sự ức chế.
TFL1 (TERMINAL FLOWER) là một gene ức chế sinh trưởng khác được tạo dòng. Đột biến tfl1 ra hoa sớm hơn và ảnh hưởng không giới hạn thông thường kết thúc với một hoa. Chức năng của TFL1 là ức chế sự hình thành hoa ở mô phân sinh chồi ngọn. Trong cây chuyển gene với 35S::TFL1, vị trí của hoa được thay thế bởi một giai đoạn tăng trưởng phát hoa mới trên cây Arabidopsis. Điều nầy cho thấy rằng gene TFL1 được sao chép ở mức độ thấp trong các vị trí nầy. Sự thể hiện quá mức của gene TFL1 ức chế sự phân hóa đến mức cây tiếp tục sinh trưởng dinh dưỡng. Nghiên cứu sự đột biến kép cho thấy gene TFL1 gây ra sự chậm trễ trong sự ra hoa bằng cách ức chế chức năng của một số gene họat động theo cơ chế tự lập như FCA, FVE và FPA. Gene TFL1 được thể hiện trong nhiều lớp tế bào bên dưới mô phân sinh chồi ngọn của cây arabidopsis nên TFL1 được bao gồm trong sự truyền tính trạng của những tín hiệu tạo ra bởi chất ức chế chương trình ra hoa ở mô phân sinh ngọn (Pidkowich và ctv., 1999).
>gi|145357903|ref|NM_121191.3| Arabidopsis thaliana embryonic flower 1 (EMF1) (EMF1) mRNA, complete cdsTTTCAAGGATAAGAGAGCTCCACTTTCTCTCTCCTCTCCTTTCTCCAACAGTCTCTCTCTACAAGCCATAGGAAAAAAAAAAAAGTCCCCCTTTCTCTCTCCCTCCCCTTTCGTCTTAGGGTTTCTCGAAAATTCGCAGTCAAATTCTACTCATCTCCCGACGAATCCATCCTTCAAGCTCATCTAATCTTCTTCTCCGTAGCTTTCTCAATCTACCGATATAGTTTTTATCCCTTGCCGCTTAAGATCGAGCTCGAATCTCGCAACCCCTTTTAATCCCTAATTTCTGGTCGGATTAACCCAGCTCTAGTTGCGGAGAGAGTATAATGGTGTATGAAAGTTAATCATCACTGAGGCATAGTATCTATCTCCTTCAAGCAAATCAATGGGATCTTCCATCAAGATCAACTCAATATCCATAGATCTCGCAGGTGCTGCCAACGAGATTGATATGGTGAAATGTGATCATTTTTCCATGCGTGGATTCGTAGCTGAAACTCGTGAGAGAGACCTTAGAAAATGTTGGCCGTTTTCAGAAGAGAGTGTTAGTTTAGTAGACCAACAAAGCTATACTCTTCCTACTTTATCTGTTCCAAAGTTTAGATGGTGGCATTGTATGAGCTGCATCAAAGATATAGATGCTCATGGGCCAAAAGATTGTGGACTGCATTCAAACTCAAAAGCTATTGGAAACTCTTCTGTTATCGAAAGTAAAAGCAAGTTCAATTCGCTAACTATCATTGATCACGAGAAAGAAAAGAAAACTGATATTGCAGATAATGCTATTGAGGAGAAAGTGGGTGTAAACTGTGAGAATGATGATCAGACAGCTACTACGTTTCTCAAGAAAGCACGTGGTCGACCTATGGGTGCTTCTAATGTTAGGAGCAAGAGCAGAAAGCTTGTGAGTCCGGAGCAGGTAGGAAACAACAGATCTAAAGAAAAACTAAACAAACCATCGATGGATATTAGCAGCTGGAAAGAGAAACAAAATGTGGATCAGGCTGTGACAACGTTCGGCTCATCTGAAATTGCTGGTGTGGTTGAGGATACACCACCTAAGGCAACCAAGAATCATAAAGGCATTCGCGGTCTGATGGAATGCGATAACGGGTCATCAGAAAGTATAAATCTTGCTATGAGTGGGTTGCAGCGTAGGAAATCTCGCAAGGTTCGTCTACTCAGTGAGTTGCTTGGTAATACAAAAACCAGTGGTGGTAGTAACATCAGAAAAGAAGAGTCTGCTTTGAAGAAGGAATCAGTTAGAGGTCGAAAAAGAAAGTTGTTACCTGAAAACAATTATGTCAGCCGGATATTGAGTACAATGGGTGCAACCTCTGAAAATGCTTCCAAAAGTTGTGACTCTGATCAAGGTAATAGTGAATCAACTGATAGTGGGTTTGACAGAACTCCATTTAAGGGTAAGCAGAGAAACAGAAGATTTCAGGTTGTTGACGAGTTTGTACCATCACTTCCTTGTGAAACTTCACAAGAAGGTATCAAGGAGCATGATGCAGATCCTAGTAAGAGATCAACTCCTGCGCACTCTT
TATTCACTGGAAACGATTCTGTTCCTTGTCCTCCGGGTACTCAGAGAACAGAGAGGAAGCTCAGTTTACCCAAGAAGAAGACAAAGAAGCCTGTAATCGATAATGGGAAGAGCACTGTGATCAGTTTTAGTAACGGCATTGATGGAAGTCAAGTTAACTCGCATACTGGTCCTTCCATGAACACAGTATCCCAAACTCGAGACTTATTGAATGGGAAAAGGGTGGGCGGTTTATTTGACAACCGTTTGGCTTCAGATGGATATTTCAGAAAATATCTCTCTCAGGTTAATGATAAGCCGATAACATCTTTGCATTTGCAAGACAATGATTATGTGAGGTCAAGAGACGCGGAACCAAACTGTCTTCGAGATTTTAGTTCCTCTTCTAAATCCAGCTCAGGTGGATGGTTGAGAACTGGAGTAGATATTGTTGACTTCAGAAACAACAACCACAATACAAACAGATCGTCTTTCTCGAACTTGAAGCTAAGATACCCCCCTTCTTCTACTGAAGTTGCGGATTTATCTCGGGTGCTGCAAAAGGATGCTTCTGGTGCAGATAGAAAGGGGAAGACTGTTATGGTCCAAGAACATCATGGAGCACCAAGAAGCCAAAGTCACGATAGAAAGGAGACTACGACTGAAGAGCAAAACAACGATGATATTCCAATGGAGATAGTGGAGCTCATGGCCAAAAACCAGTACGAGAGGTGTCTTCCCGACAAAGAAGAAGATGTTAGCAACAAACAGCCATCACAAGAAACAGCACACAAATCCAAGAATGCTCTACTGATTGATCTCAATGAAACCTACGATAACGGGATCTCACTTGAGGACAACAACACATCAAGACCACCAAAACCGTGTAGTAGCAACGCAAGGAGGGAAGAACATTTTCCTATGGGAAGACAGCAGAACTCTCATGACTTCTTCCCAATAAGTCAGCCTTATGTGCCTTCTCCGTTTGGGATCTTTCCTCCTACCCAAGAAAACCGAGCCAGCTCCATCCGGTTTTCTGGTCACAACTGTCAGTGGCTTGGGAATTTGCCAACTGTGGGTAATCAGAACCCTTCTCCATCCTCATTTCGGGTATTACGTGCTTGTGATACTTGCCAGAGTGTTCCTAATCAATACAGAGAAGCTTCTCATCCAATTTGGCCATCTTCCATGATACCACCACAGAGTCAATACAAGCCAGTTTCTTTAAATATTAATCAGTCAACAAATCCGGGTACGCTTTCACAGGCATCTAACAATGAAAATACATGGAACCTCAACTTTGTTGCTGCCAACGGGAAGCAAAAATGTGGGCCTAATCCAGAATTTTCATTTGGCTGCAAACATGCTGCTGGGGTTAGTAGTAGTAGTAGTAGGCCAATAGATAACTTTTCTAGTGAGAGCTCTATACCGGCATTGCATCTACTCAGCCTTCTGGATCCTCGCCTGAGGTCAACGACTCCCGCTGACCAACACGGAAACACTAAATTTACTAAAAGACATTTTCCGCCAGCCAACCAGTCCAAAGAGTTTATAGAGCTTCAAACAGGGGACTCTAGTAAGTCAGCCTACTCAACTAAGCAGATACCTTTTGATCTATACAGCAAGAGATTCACACAAGAGCCTTCCCGGAAGAGTTTCCCCATCACTCCACCTATTGGGACGTCTTCACTTTCATTTCAAAATGCTTCATGGAGTCCTCATCATCAAGAGAAGAAAACCAAGAGAAAAGACACCTTTGCTCCTGTTTACAATACTCATGAAAAGCCGGTGTTTGCAAGCAGCAACGACCAAGCGAAGTTCCAGCTGCTGGGAGCATCGAATTCCATGATGCTTCCTTTGAAATTTCACATGACGGATAAAGAAAAGAAACAAAAGAGAAAAGCAGAGAGCTGCAATAACAATGCCTCTGCGGGACCTGTGAAGAACAGTTCTGGACCCATTGTGTGCAGCGTCAATAGAAACCCTGCTGATTTCACCATTCCTGAACCTGGGAATGTTTACATGTTAACGGGTGAACATCTGAAAGTCCGTAAACGCACAACCTTCAAGAAAAAGCCAGCCGTGTGTAAGCAGGACGCAATGAAGCAGACCAAGAAGCCGGTTTGTCCACCTACACAAAATGCCTAAAGATATACAATGTGTGTGGGAGGGATTTGTGCAGTTCATTGTGAAACAGATACTGAGGCAGAGGGATTAACAGATGGAGAGGGATACAAAGAGAGGGAGAGAGACAGAGACAGAGAAAGAGAAAGAGAGATCATTCCTATTGAAAACAAGAATAAGTCAGACAGGAAACATTAAAATGCAAATCTTCCTCATGTTCTTGGTCTCTGGTCTTAAAAACATATCTTTGCTTATGGTTTGTTCAAGCATACTTGGGAACCATTCAGCTTGTGTATATATTTAAATGACTGTAGTACCCCTGATAGGCCTTGTTGTTTTTTGTTTGTTTTTTTGGGAAATACTAGATACCTTTCAGCTGGCGTTATATATATATTTAGTCTTTATTT
>gi|347015062|gb|JF806630.1| Pyracantha fortuneana TFL1-like protein (TFL1) gene, complete cdsCAACCATACAAGGATTCCACTCCCAAGCAATATAAGAAGTGCTATTAGTTCCTCCTGAATTGACTTATCCATTAATCTTTTCTTTTTACACTCTCTCTCTCTCTCCCTTAAAATGACAAGAGCCTCGGAGCCTCTGGTTGTTGGGAGAGTGATAGGAGATGTTCTTGATTCCTTCACTGCAACAACAAAAATGTCTGTCACTTACAACACCAAGCTAGTCTGCAATGGACTTGAGCTCTTTCCTTCTGTTGTCACAGCCAAACCTAGAGTTGAGATTCAAGGAGGGGATATGAGATGTTTCTTTACTTTGGTATATATAAATCGATCTGTTATTAATGAATTGAGTAGTTCTTGTTTGTATTTAACCATCATTATATTACTCCCTAACCCTTACTCCCCCTTATTGGCATATTAATTTGATGTTATTGTTTTGAAGTCTTGTGATAGTTTTCTTAATCTTGCAGGTGATGACAGGCCCAGATTTTCCTGGCCCTAGTGATCCTTATCTAAGGGAGCACCTGCACTGGTATACACCACCACTATGAATTTATTTATATTTTTTTTTGGTTACACATATGAAATAACTTAACCTAGCTTTAAAGTGGAAGGTTAACCTAGATACAAATCAATTTAATTTTTTCTATCGAAACAAATTAATTTGATTAAAAGACCAAATAAACATTATGGGCCGGAGATTTTACGGTATTTTATTGAAAAAAATAAAATATCGGTACATTTTAACATACACATGATGTTCAAAATTACACTACAAGGTTAGGTTCAAGTGAATAAAAAAAGAAAGATGTGATTATACTATAACAAGGTTGGTAGTTACATTGTGGACGTTCTATTACATTGTTAAGGTAGGTTTTTGTACTTGAACGTGATTGGATTACAAAATTAACGTTTATTATTATACCTATACATGTGTTATTACTACAAACATTATGAACTTACACAACATCATAATCGTGTTACCACATGACGTCAACATACAAGATCTAAGGTAAAGTTACATTGTAATTGTTCAAATTTACACTCCAAGGTCACATGATTTTCTTAATGTTACATTTAATTACATCAAATGACGTTGTGAACGT
TAAATTACACTGTTAATGTAATATATTATAGTTGAACATTAATGCAATACAGTTAACGTTCAAATTAAATAACTAGTACTTTATTTTTTAATAAGGTATCATAGACGGACCTAAACATTACATTAATTAATTTCAGCATGCTATACATATTCTCATAAAGTACTATCATTTCCCAAAGCCCTATAAAGTACGTAGGCATTTTCATCATAAAGAAGATGAAGAAAAAGTGTAGGCATTTTCATCAAGAAGTAGAAGAAGAAAAACTGTCGACAATATTAGTGTCCTTCTGTACTCGTTAAGCATCAACCATAGTTACCAGCTGTAAAGAGCTATAAACATGCAAAGAAAAATTGTTGAGTACAAAACTAACAAAAATTACGACTGTAGTCCTTCTGTACTTGTTATACCTTTGCCGTAATTTTGTGCTCGTTTGATTTTTTTTTTTTCATACAAAACTAACAAAAATTTCTCAAATAACAGGATTGTGACAGACATTCCAGGCACCACAGATGCCACATTTGGTAAGTCCTACATATACAAGATATTAGCATTCATGGTGTTTGTTTCCCTTCATATACAAGATATTAGCATTCATGGTGTTTGTTTCCCTTTCTTTCAATAAGTTGGCTAATTTAGGGTTTAATTAATCGTATTAACAGGAAGAGAGGTGGTGAGTTACGAGATGCCGAGGCCCAACATTGGCATCCACAGGTTTGTGTTTGTTCTCTTCAAGCAGAATCGAAGACAATCAATCAACACACCTTCGTCGAGGGATCACTTCAGCACTCGAAGCTTCGCGGCTGAAAATGACCTGGGTCTTCCTGTCGCTGCCGTCTACTTCAGCGCGCAGAGAGAAACTGCAGCTAGAAGACGCTAGCTAGTAGCTCTACCCAGAACTCCTCCATCCATTATCCATATATATGTTAAATAAAGGCTTCTTTAGAGATAGGCCATTGTAACTCTTGTTTCCCGATAACCTTAATTTTAACTTGTTGACGTGTAAGAAAATAAGTAACCTGTTATTACAAATTATTTACAATGTATGCCACAATATCTTAATTATGTTAAAAAAAATTATTATTACCTAAAATAATTATGAATTTCGTTGTGTATTAATAGGCATGATTTCAGATTTTGTTTTTTCCCTCTGAATTTTTTATTTTTTATTTTTATTTTTTTTGAAAAAAAATGAAACAACTGGCGTGGCAAGCCATCCCTTTCGGGACGTTTTGGAACCAAAAAGACTATGAAAATTTTTATCCTACCCGTAACCACAGTCAAGCAA
THE END!
CẢM ƠN THẦY VÀ CÁC ANH CHỊ ĐÃ CHÚ Ý LẮNG NGHE!
* Một số tài liệu cũ có thể bị lỗi font khi hiển thị do dùng bộ mã không phải Unikey ...

Người chia sẻ: Võ Phương Thảo
Dung lượng: | Lượt tài: 1
Loại file:
Nguồn : Chưa rõ
(Tài liệu chưa được thẩm định)