Công nghệ tế bào đông vật: quy trình nuôi cấy mô

KHÁI QUÁT CHUNG VỀ ENZYME AMYLASE
Khái niệm về enzyme amylase:
Enzyme amylase là một hệ enzyme rất phổ biến trong giới sinh vật. Enzyme này thuộc nhóm enzyme thủy phân,xúc tác phân giải liên kết nội phân tử trong nhóm polysaccharide với sự tham gia của nước.
RR’ + H-OH RH + R’OH

Phân loại enzyme amylase:
Hiện nay có 6 loại enzyme amylase chia làm 2 nhóm chính là: endoamylase và exoamylase.
Endoamylase:gồm có α-amylase và nhóm ezyme khử nhánh
Exoamylase :gồm có β-amylase và ϒ-amylase
enzyme α-amylase:
là một enzyme loại protein thủy phân liên kết alpha của các polysaccharide chứa liên kết alpha như tinh bột và glycogen và maltose .
Đây là dạng chủ yếu của amylase được tìm thấy ở người và các động vật có vú khác.
Nó có mặt trong các loại hạt giống sử dụng tinh bột như một loại năng lương dư trữ và có trong chất tiết của nhiều loại nấm.
III.Công nghệ lên men tạo enzym α-amylase

2. Quy trình lên men công nghiệp enzym α-amylase:
Nguyên liệu:
Nguyên liệu để sản xuất chủ yếu là:Tinh Bột
Nguồn cung cấp tinh bột: Gạo, ngô, sắn(khoai mì)
b) Sơ đồ quy trình lên men

Nguyên liệu
Xử Lý
nguyên liệu
Thanh trùng
Cấy giống
Lên men sinh tổng hợp enzym
Ly tâm:thu nhận chế phẩm enzym thô
Tách và tinh sạch enzym
Chế phẩm enzym
Giống vi sinh vật
Nhân giống
Nguyên liệu:
Trong phương pháp lên men bề mặt: Nguyên liệu chủ yếu là cám gạo,cám mì. Hai loại này hầu như không cần bổ xung thêm thành phần nào nữa.Nếu cần bổ xung thêm thì thêm trấu và mùn cưa… để làm tăng độ xốp giúp nấm phát triển tốt hơn,tận dung tối đa nguồn cơ chất để sinh hoạt lục enzym cao nhất.

Chú ý:- Cám không được chưa tinh bột dưới 20-30%
- Nên dùng cám tốt,mới không có vị chua ,vị đắng
- Độ ẩm của cám không quá 15%,
- tạp chất,chất độc không quá 0.05%
Thanh trùng:
Cám,chất phụ gia,canh trường nuôi cấy được hấp thanh trùng để loại bỏ nấm mốc khác (nấm mốc ngoại lai)
Thanh trùng dưới áp suất hơi 1-1,5 atm, thời gian từ 45-60 phút.
Sau khi thanh trùng môi trường để nguội để bắt đầu nuôi cấy thu nhận enzym
Cấy giống vsv:
-Cấy giống hoặc rắc bào tử lên môi trường, ủ thành đống vài giờ
- Tỉ lệ giống đưa vào nuôi cấy thường khoảng 0,5-20% so với khối lượng của môi trường
 
Thu nhận sản phẩm:
-Kết thúc quá trình nuôi cấy ta thu được enzym thô.Để đảm bảo cho enzym thô không bị mất hoạt tính người ta nhanh chóng đem đi sấy khô đến một độ ẩm.

-Có thể dùng enzym thô này ngay khi không cần tinh sạch.

-Nếu cân tinh sạch người ta tiến hành như sau:
+ Nghiền nhỏ enzym thô để vừa phá vỡ thành tế bào vừa làm nhỏ thành phần của chế phẩm thô.
+ Người ta thường sử dụng chất trợ nghiền là thạch anh và bột thủy tinh.
+Sau khi nghiền người ta cho nước tiến hành trích ly enzym. Cứ 1 phần enzym khô người ta cho thêm 4-5 phần nước. Lọc lấy dịch,bã cho thức ăn chăn nuôi.
 
c) Các yếu tố ảnh hưởng quá trình lên men: